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產(chǎn)品中心

產(chǎn)品詳情

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產(chǎn)品名稱：羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒PCR試劑盒
產(chǎn)品型號(hào)：50次
產(chǎn)品廠商：通蔚生物
產(chǎn)品價(jià)格：2990
產(chǎn)品庫(kù)存：100
產(chǎn)品文檔：

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簡(jiǎn)單介紹：

羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒PCR試劑盒引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒，與其他病原沒(méi)有交叉反應(yīng)。提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。PCR mix 中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。

詳情介紹：

羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒PCR試劑盒

產(chǎn)品及特點(diǎn)：

羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒(Sheep-associated Malignant Catarrhal FeverVirus，SA-MCFV)是一種存在于上皮細(xì)胞屑中的病毒，能夠引發(fā)以體表無(wú)毛處皮膚痘疹，能夠使上呼吸道、口腔和食管部黏膜形成纖維素性壞死假膜。該病毒對(duì)外界是環(huán)境的抵抗力相當(dāng)強(qiáng)，在上皮細(xì)胞屑中的病毒，雖然完全干燥和被直射日光作用許多星期，還不致被殺死；加熱至 60℃需經(jīng) 3 小時(shí)才被殺死，在-15℃以下的環(huán)境中可保持活力多年。1%的火堿、1%的醋酸或 0.1%的升汞可于 5 分鐘內(nèi)殺死此病毒，較強(qiáng)的抵抗力對(duì)羊的健康有巨大的潛在危害，因此羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒的快速準(zhǔn)確鑒定對(duì)該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用。本產(chǎn)品就是根據(jù)羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量PCR 產(chǎn)品，

它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供DNA模板。

2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒，與其他病原沒(méi)有交叉反應(yīng)。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次，但只能用于科研。

規(guī)格及成分：

編號(hào)	成分	規(guī)格
試劑一	PCR MagicMix 3.0	1 mL（紅蓋）
試劑二	超純水	1 mL（亮黃色）
試劑三	羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒 PCR 引物混合液	100 μL（白蓋）
試劑四	羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（1×10E8 /μL）	50 μL（黃蓋）
試劑五	使用手冊(cè)	1 份

運(yùn)輸及保存：
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置，不要污染其他試劑。

自備試劑：
樣品 DNA。

羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒PCR試劑盒
使用方法：

一、樣品 DNA 的制備：

1. 用自選方法純化N+2個(gè)樣品的DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。可以選用本公司柱式病毒 DNAout。

2. 如果有N個(gè)樣品，則需要做N+2個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽(yáng)性對(duì)照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 1000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后得到模板 DNA 放冰上待用。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）：

3. 對(duì)N+2個(gè)樣品，在PCR時(shí)需要增加一個(gè)PCR陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)PCR陰性對(duì)照，故需要設(shè)置N+4個(gè)反應(yīng)。在N+4個(gè)PCR管中分別加入下列成分：

成份	N+2 個(gè)樣品管	PCR 陰性對(duì)照	PCR陽(yáng)性對(duì)照
PCR Magic Mix 3.0	各 20μL	20μL	20μL
羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒PCR 引物混合液	各2μL	2μL	2μL
N+2個(gè)樣品DNA模板	各18μL	--	--
PCR 陰性對(duì)照（水）	--	18μL	--
PCR 陽(yáng)性對(duì)照（羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒PCR陽(yáng)性對(duì)照1000倍稀釋液）	--	--	18μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

過(guò)程	溫度	時(shí)間
預(yù)變性	95℃	5 min
PCR 反應(yīng)（35 個(gè)循環(huán)）	95℃	30 sec
	55℃	30 sec
	72℃	40 sec
延伸	72℃	7 min

三、電泳檢測(cè)：

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽(yáng) 性對(duì)照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增，否則實(shí) 驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。

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